◎ अष्टपैलू, विश्वासार्ह ऑन-डिमांड लिक्विड हाताळणीसाठी मायक्रोस्विच

www.chinacdoe.com ला भेट दिल्याबद्दल धन्यवाद.तुम्ही वापरत असलेल्या ब्राउझर आवृत्तीमध्ये मर्यादित CSS सपोर्ट आहे.सर्वोत्तम अनुभवासाठी, आम्ही शिफारस करतो की तुम्ही अद्ययावत ब्राउझर वापरा (किंवा इंटरनेट एक्सप्लोररमध्ये सुसंगतता मोड अक्षम करा).दरम्यान, सतत समर्थन सुनिश्चित करण्यासाठी, आम्ही साइटला शैली आणि JavaScript शिवाय रेंडर करू.

ऑन-साइट क्षमतांसह लॅब-ऑन-ए-चिप प्रणाली जलद आणि अचूक निदानाची क्षमता देतात आणि जैववैद्यकीय उपकरणे आणि प्रशिक्षित व्यावसायिक उपलब्ध नसलेल्या संसाधन-प्रतिबंधित सेटिंग्जमध्ये उपयुक्त आहेत.तथापि, एक पॉइंट-ऑफ-केअर चाचणी प्रणाली तयार करणे ज्यामध्ये एकाच वेळी मल्टी-फंक्शनल डिस्पेंसिंग, ऑन-डिमांड रिलीज, विश्वासार्ह कार्यप्रदर्शन आणि अभिकर्मकांच्या दीर्घकालीन स्टोरेजसाठी सर्व आवश्यक वैशिष्ट्ये आहेत.येथे आम्ही लीव्हर-ॲक्ट्युएटेड मायक्रो ट्रॅव्हल स्विच तंत्रज्ञानाचे वर्णन करतो जे कोणत्याही दिशेने द्रव हाताळू शकते, लागू केलेल्या हवेच्या दाबाला अचूक आणि प्रमाणबद्ध प्रतिसाद देऊ शकते आणि अचानक हालचाली आणि कंपनांविरूद्ध स्थिर राहू शकते.तंत्रज्ञानाच्या आधारे, आम्ही पॉलिमरेझ चेन रिॲक्शन सिस्टमच्या विकासाचे वर्णन देखील करतो जी अभिकर्मक परिचय, मिश्रण आणि प्रतिक्रिया कार्ये सर्व एकाच प्रक्रियेत एकत्रित करते, जी 18 रुग्णांच्या सर्व क्लिनिकल अनुनासिक नमुन्यांची "सॅम्पल-इन-उत्तर-आउट" कार्यप्रदर्शन पूर्ण करते. इन्फ्लूएंझा आणि 18 वैयक्तिक नियंत्रणे, मानक पॉलिमरेझ चेन रिॲक्शन (पीअरसन गुणांक > 0.9) सह फ्लोरोसेन्स तीव्रतेच्या चांगल्या सुसंगततेत.तंत्रज्ञानाच्या आधारे, आम्ही पॉलिमरेझ चेन रिॲक्शन सिस्टमच्या विकासाचे देखील वर्णन करतो जी अभिकर्मक परिचय, मिश्रण आणि प्रतिक्रिया कार्ये सर्व एकाच प्रक्रियेत एकत्रित करते, जी 18 रुग्णांच्या सर्व क्लिनिकल अनुनासिक नमुन्यांची "सॅम्पल-इन-उत्तर-आउट" कार्यप्रदर्शन पूर्ण करते. इन्फ्लूएंझा आणि 18 वैयक्तिक नियंत्रणांसह, मानक पॉलिमरेझ चेन रिॲक्शन (पीअरसन गुणांक > 0.9) सह फ्लोरोसेन्स तीव्रतेच्या चांगल्या सुसंगततेत.Основываясь на этой технологии, мы также описываем разработку системы полимеразной цепной реакции, которая объединяет функции введения реагентов, смешивания и реакции в одном процессе, что обеспечивает выполнение «образец-в-ответ-выход» для всех клинических образцов из носа от 18 пациентов с Грипп и 18 отдельных контролей, в хорошем соответствии интенсивности флуоресценции со стандарткой полимеразной полимеразной полимеразной полимеразной цепицыфин на>0,9).या तंत्रज्ञानाच्या आधारे, आम्ही पॉलिमरेझ चेन रिॲक्शन सिस्टीमच्या विकासाचे वर्णन करतो जे एकाच प्रक्रियेत इंजेक्शन, मिक्सिंग आणि रिॲक्शनची कार्ये एकत्र करते, 18 इन्फ्लूएंझा रुग्णांमधील सर्व क्लिनिकल अनुनासिक नमुन्यांसाठी नमुना-इन-प्रतिसाद-आउट सक्षम करते.आणि 18 वैयक्तिक नियंत्रणे, मानक पॉलिमरेझ चेन रिॲक्शन फ्लूरोसेन्स तीव्रतेसह (पीअर्सनचे गुणांक > 0.9) चांगल्या करारात.या तंत्रज्ञानाच्या आधारे, आम्ही पॉलिमरेझ चेन रिएक्शन सिस्टमच्या विकासाचे वर्णन करतो जे 18 इन-नमुना नाकातील रुग्णांच्या नमुन्यांमधून सर्व नैदानिक ​​अनुनासिक नमुन्यांचे विश्लेषण करण्यासाठी अभिकर्मक इंजेक्शन, मिक्सिंग आणि प्रतिक्रिया कार्ये एकत्रित करते. इन्फ्लूएंझा आणि 18 वैयक्तिक नियंत्रणे, फ्लूरोसेन्स तीव्रता जुळली. मानक पॉलिमरेझ चेन रिॲक्शनसह (पीअरसनचे गुणांक > ०.९).प्रस्तावित प्लॅटफॉर्म बायोमेडिकल विश्लेषणाच्या विश्वासार्ह ऑटोमेशनची हमी देतो आणि अशा प्रकारे पॉइंट-ऑफ-केअर चाचणी उपकरणांच्या श्रेणीच्या व्यापारीकरणास गती देऊ शकतो.
2020 कोविड-19 साथीच्या आजारासारखे उदयोन्मुख मानवी रोग, ज्याने लाखो लोकांचे प्राण घेतले आहेत, जागतिक आरोग्य आणि मानवी सभ्यता 1 साठी गंभीर धोका आहे.विषाणूचा प्रसार नियंत्रित करण्यासाठी आणि उपचारांचे परिणाम सुधारण्यासाठी लवकरात लवकर, जलद आणि अचूक रोग ओळखणे महत्त्वाचे आहे.केंद्रीकृत लॅबवर आधारित कोर डायग्नोस्टिक इकोसिस्टम जिथे चाचणी नमुने हॉस्पिटल किंवा डायग्नोस्टिक क्लिनिकमध्ये पाठवले जातात आणि व्यावसायिकांद्वारे चालवले जातात, सध्या जगभरातील सुमारे 5.8 अब्ज लोकांसाठी प्रवेश प्रतिबंधित आहे, विशेषत: संसाधन-मर्यादित सेटिंग्जमध्ये राहणारे.जिथे महागड्या बायोमेडिकल उपकरणांचा आणि पात्र तज्ञांचा अभाव आहे.चिकित्सक 2. अशाप्रकारे, पॉइंट-ऑफ-केअर टेस्टिंग (POCT) क्षमतेसह स्वस्त आणि वापरकर्ता-अनुकूल लॅब-ऑन-ए-चिप प्रणाली विकसित करण्याची तातडीची गरज आहे जी डॉक्टरांना वेळेवर निदान माहिती प्रदान करू शकते आणि सूचित निदान निर्णय घेऊ शकते. .आणि उपचार 3.
वर्ल्ड हेल्थ ऑर्गनायझेशन (WHO) मार्गदर्शक तत्त्वे सांगतात की एक आदर्श POCT परवडणारा, वापरकर्ता-अनुकूल (किमान प्रशिक्षणासह वापरण्यास सोपा), अचूक (खोट्या नकारात्मक किंवा चुकीच्या सकारात्मक गोष्टी टाळा), जलद आणि विश्वासार्ह (चांगले पुनरावृत्तीयोग्य गुणधर्म प्रदान करणे) आणि वितरित करण्यायोग्य (दीर्घकालीन स्टोरेजसाठी सक्षम आणि अंतिम वापरकर्त्यांसाठी सहज उपलब्ध)4.या आवश्यकता पूर्ण करण्यासाठी, POCT प्रणालींनी खालील वैशिष्ट्ये प्रदान करणे आवश्यक आहे: मॅन्युअल हस्तक्षेप कमी करण्यासाठी बहुमुखी डोसिंग, अचूक चाचणी परिणामांसाठी अभिकर्मक वाहतूक स्केल करण्यासाठी मागणीनुसार रिलीझ आणि पर्यावरणीय कंपनांना तोंड देण्यासाठी विश्वसनीय कार्यप्रदर्शन.सध्या, सर्वात मोठ्या प्रमाणावर वापरले जाणारे POCT उपकरण आहे पार्श्व प्रवाही पट्टी 5,6 ज्यामध्ये सच्छिद्र नायट्रोसेल्युलोज झिल्लीचे अनेक स्तर असतात जे केशिका शक्तीद्वारे पूर्व-अचल अभिकर्मकांसह प्रतिक्रिया देऊन, अगदी कमी प्रमाणात नमुना पुढे ढकलतात.त्यांच्याकडे कमी किमतीचा, वापरात सुलभता आणि जलद परिणामांचा फायदा असला तरी, फ्लो स्ट्रिप-आधारित POCT उपकरणे केवळ जैविक चाचण्यांसाठी वापरली जाऊ शकतात (उदा. ग्लुकोज चाचण्या7,8 आणि गर्भधारणा चाचण्या 9,10) मल्टी-स्टेज विश्लेषणांची आवश्यकता न घेता.प्रतिक्रिया (उदा. अनेक अभिकर्मकांचे लोडिंग, मिक्सिंग, मल्टीप्लेक्सिंग).याव्यतिरिक्त, द्रव हालचालींवर नियंत्रण ठेवणारी प्रेरक शक्ती (म्हणजे, केशिका बल) चांगली सुसंगतता प्रदान करत नाही, विशेषत: बॅचमध्ये, परिणामी खराब पुनरुत्पादनक्षमता 11 आणि पार्श्व प्रवाह बँड प्रामुख्याने चांगल्या शोधासाठी उपयुक्त ठरतात.12,13.
सूक्ष्म आणि नॅनोस्केलमध्ये विस्तारित उत्पादन क्षमतांनी परिमाणात्मक मापनांसाठी मायक्रोफ्लुइडिक पीओसीटी उपकरणांच्या विकासासाठी संधी निर्माण केल्या आहेत14,15,16,17.इंटरफेस 18, 19 चे गुणधर्म आणि 20, 21, 22 चॅनेलची भूमिती समायोजित करून, या उपकरणांचे केशिका बल आणि प्रवाह दर नियंत्रित केला जाऊ शकतो.तथापि, त्यांची विश्वासार्हता, विशेषत: जास्त ओल्या द्रवपदार्थांसाठी, उत्पादनातील अयोग्यता, भौतिक दोष आणि पर्यावरणीय कंपनांना संवेदनशीलता यामुळे अस्वीकार्य राहते.याव्यतिरिक्त, द्रव-वायू इंटरफेसवर केशिका प्रवाह तयार केल्यामुळे, विशेषत: मायक्रोफ्लुइडिक चॅनेल द्रवाने भरल्यानंतर कोणताही अतिरिक्त प्रवाह सादर केला जाऊ शकत नाही.म्हणून, अधिक जटिल शोधासाठी, नमुना इंजेक्शनचे अनेक चरण 24,25 करणे आवश्यक आहे.
मायक्रोफ्लुइडिक उपकरणांमध्ये, सेंट्रीफ्यूगल मायक्रोफ्लुइडिक उपकरणे सध्या POCT26,27 साठी सर्वोत्तम उपाय आहेत.त्याची ड्राइव्ह यंत्रणा फायदेशीर आहे कारण रोटेशनल गती समायोजित करून चालक शक्ती नियंत्रित केली जाऊ शकते.तथापि, गैरसोय असा आहे की केंद्रापसारक शक्ती नेहमी उपकरणाच्या बाहेरील काठाकडे निर्देशित केली जाते, ज्यामुळे अधिक जटिल विश्लेषणासाठी आवश्यक असलेल्या बहु-चरण प्रतिक्रियांची अंमलबजावणी करणे कठीण होते.जरी अतिरिक्त प्रेरक शक्ती (उदा. केशिका 28, 29 आणि इतर अनेक 30, 31, 32, 33, 34, 35) केंद्रापसारक शक्ती व्यतिरिक्त बहुकार्यात्मक डोसिंगसाठी सादर केली गेली असली तरीही, अप्रत्याशित द्रव हस्तांतरण होऊ शकते कारण ही अतिरिक्त शक्ती सामान्यतः ऑर्डर असते. केंद्रापसारक शक्तीपेक्षा कमी परिमाण, ते फक्त लहान ऑपरेटिंग श्रेणींमध्ये प्रभावी बनवते किंवा द्रव सोडल्याबरोबर मागणीनुसार उपलब्ध नसते.सेंट्रीफ्यूगल मायक्रोफ्लुइडिक्समध्ये न्यूमॅटिक मॅनिपुलेशन समाविष्ट करणे जसे की सेंट्रीफ्यूगल काइनेटिक पद्धती 36, 37, 38, थर्मोप्न्यूमॅटिक पद्धती 39 आणि सक्रिय वायवीय पद्धती 40 हे एक आकर्षक पर्याय असल्याचे सिद्ध झाले आहे.काउंटरफ्यूगोडायनामिक पध्दतीने, बाह्य आणि अंतर्गत दोन्ही क्रियांसाठी अतिरिक्त पोकळी आणि कनेक्टिंग मायक्रोचॅनल्स डिव्हाइसमध्ये एकत्रित केले जातात, जरी त्याची पंपिंग कार्यक्षमता (75% ते 90% पर्यंत) पंपिंग सायकलच्या संख्येवर आणि चिकटपणावर अवलंबून असते. द्रव च्या.थर्मोप्न्यूमॅटिक पद्धतीमध्ये, लेटेक्स मेम्ब्रेन आणि फ्लुइड ट्रान्सफर चेंबर विशेषत: इनलेट सील करण्यासाठी किंवा पुन्हा उघडण्यासाठी डिझाइन केलेले असतात जेव्हा अडकलेल्या हवेचे प्रमाण गरम किंवा थंड केले जाते.तथापि, हीटिंग/कूलिंग सेटअप मंद प्रतिसाद समस्यांचा परिचय करून देते आणि थर्मोसेन्सिटिव्ह ऍसेसमध्ये (उदा., पॉलिमरेझ चेन रिएक्शन (पीसीआर) प्रवर्धन) मध्ये त्याचा वापर मर्यादित करते.सक्रिय वायवीय दृष्टिकोनासह, मागणीनुसार रिलीझ आणि आवक हालचाली एकाच वेळी सकारात्मक दाब आणि उच्च-स्पीड मोटर्सद्वारे अचूकपणे जुळलेल्या रोटेशनल गतींच्या वापराद्वारे प्राप्त होतात.फक्त वायवीय ॲक्ट्युएटर (सकारात्मक दाब 41, 42 किंवा नकारात्मक दाब 43) आणि सामान्यतः बंद वाल्व डिझाइन वापरून इतर यशस्वी पध्दती आहेत.वायवीय चेंबरमध्ये सलग दबाव टाकून, द्रव पेरिस्टाल्टिक पद्धतीने पुढे पंप केला जातो आणि सामान्यपणे बंद झडप पेरिस्टॅलिसिसमुळे द्रव परत येण्यास प्रतिबंध करते, त्यामुळे जटिल द्रव ऑपरेशन्स लक्षात येतात.तथापि, सध्या केवळ मर्यादित संख्येत मायक्रोफ्लुइडिक तंत्रज्ञान आहेत जे एकाच पीओसीटी उपकरणामध्ये जटिल द्रव ऑपरेशन करू शकतात, ज्यामध्ये मल्टी-फंक्शनल डिस्पेंसिंग, ऑन-डिमांड रिलीझ, विश्वासार्ह कामगिरी, दीर्घकालीन स्टोरेज, उच्च-स्निग्धता द्रव हाताळणे, आणि किफायतशीर उत्पादन.सर्व एकाच वेळी.आजवर खुल्या बाजारात सेफेड, बिन्क्स, व्हिस्बी, कोबास लिएट आणि रोंडा सारखी काही व्यावसायिक पीओसीटी उत्पादने यशस्वीरीत्या सादर करण्याचे एक कारण बहु-चरणीय कार्याचा अभाव हे देखील असू शकते.
या पेपरमध्ये, आम्ही ग्रीन रिंग मायक्रो स्विच तंत्रज्ञान (FAST) वर आधारित वायवीय मायक्रोफ्लुइडिक ॲक्ट्युएटर प्रस्तावित करतो.FAST मायक्रोलिटरपासून मिलिलिटरपर्यंतच्या विस्तृत अभिकर्मकांसाठी एकाच वेळी सर्व आवश्यक गुणधर्म एकत्र करते.फास्टमध्ये लवचिक पडदा, लीव्हर आणि ब्लॉक्स असतात.हवेच्या दाबाचा वापर न करता, पडदा, लीव्हर आणि ब्लॉक्स घट्ट बंद केले जाऊ शकतात आणि आत द्रव बराच काळ साठवला जाऊ शकतो.जेव्हा योग्य दाब लागू केला जातो आणि लीव्हरच्या लांबीमध्ये समायोजित केला जातो, तेव्हा डायफ्राम विस्तारतो आणि लीव्हरला मोकळ्या स्थितीत ढकलतो, ज्यामुळे द्रव बाहेर जाऊ शकतो.हे कॅस्केड, एकाचवेळी, अनुक्रमिक किंवा निवडक पद्धतीने द्रवांचे बहु-कार्यात्मक मीटरिंग करण्यास अनुमती देते.
आम्ही इन्फ्लूएन्झा A आणि B विषाणू (IAV आणि IBV) शोधण्यासाठी नमुन्यातील प्रतिसादात परिणाम निर्माण करण्यासाठी FAST वापरून PCR प्रणाली विकसित केली आहे.आम्ही 102 प्रती/एमएल शोधण्याची कमी मर्यादा (LOD) गाठली, आमच्या मल्टिप्लेक्स परखने IAV आणि IBV साठी विशिष्टता दर्शविली आणि इन्फ्लूएंझा व्हायरस पॅथोटाइपिंगला परवानगी दिली.18 रूग्ण आणि 18 निरोगी व्यक्तींच्या अनुनासिक स्वॅब नमुन्याचा वापर करून क्लिनिकल चाचणीचे परिणाम मानक RT-PCR (पीअरसन गुणांक > 0.9) सह फ्लोरोसेन्स तीव्रतेमध्ये चांगले एकरूपता दर्शवतात.18 रूग्ण आणि 18 निरोगी व्यक्तींच्या अनुनासिक स्वॅब नमुन्याचा वापर करून क्लिनिकल चाचणीचे परिणाम मानक RT-PCR (पीअरसन गुणांक > 0.9) सह फ्लोरोसेन्स तीव्रतेमध्ये चांगले एकरूपता दर्शवतात.Результаты клинических испытаний с использованием образца мазка из носа от 18 пациентов и 18 здоровых лици показатевых нсивности флуоресценции стандартной ОТ-ПЦР (коэффициенты Пирсона > ०,९).18 रुग्ण आणि 18 निरोगी व्यक्तींच्या अनुनासिक स्वॅबच्या नमुन्याचा वापर करून क्लिनिकल चाचण्यांचे परिणाम मानक RT-PCR (पीअरसनचे गुणांक > 0.9) च्या फ्लूरोसेन्स तीव्रतेमध्ये चांगले सहमती दर्शवतात.0.9) .......................... Результаты клинических испытаний с использованием образцов назальных мазков от 18 пациентов и 18 здоливых лица пациентов ду интенсивностью флуоресценции и стандартной ОТ-ПЦР (коэффициент Пирсона > ०,९).18 रूग्ण आणि 18 निरोगी व्यक्तींच्या अनुनासिक स्वॅबच्या नमुन्यांचा वापर करून क्लिनिकल चाचण्यांच्या परिणामांमध्ये फ्लूरोसेन्स तीव्रता आणि मानक RT-PCR (पीअरसन गुणांक > 0.9) यांच्यात चांगला करार दिसून आला.फास्ट-पीओसीटी उपकरणाची अंदाजे सामग्रीची किंमत अंदाजे US$1 (पूरक तक्ता 1) आहे आणि मोठ्या प्रमाणात उत्पादन पद्धती (उदा. इंजेक्शन मोल्डिंग) वापरून ती आणखी कमी केली जाऊ शकते.खरं तर, FAST-आधारित POCT उपकरणांमध्ये WHO द्वारे अनिवार्य केलेली सर्व आवश्यक वैशिष्ट्ये आहेत आणि प्लाझ्मा थर्मल सायकलिंग 44, एम्प्लीफिकेशन-फ्री इम्युनोअसेस45 आणि नॅनोबॉडी फंक्शनलायझेशन टेस्ट 46 यासारख्या नवीन जैवरासायनिक चाचणी पद्धतींशी सुसंगत आहेत जे POCT प्रणालींचा कणा आहेत.शक्यता
अंजीर वर.1a FAST-POCT प्लॅटफॉर्मची रचना दर्शविते, ज्यामध्ये चार लिक्विड चेंबर असतात: एक प्री-स्टोरेज चेंबर, एक मिक्सिंग चेंबर, एक प्रतिक्रिया चेंबर आणि एक कचरा चेंबर.प्री-स्टोरेज चेंबर आणि मिक्सिंग चेंबरमध्ये स्थित FAST डिझाईन (लवचिक पडदा, लीव्हर आणि ब्लॉक्सचा समावेश असलेले) द्रव प्रवाह नियंत्रणाची गुरुकिल्ली आहे.वायवीय पद्धतीने कार्यान्वित केलेली पद्धत म्हणून, FAST डिझाइन क्लोज्ड/ओपन स्विचिंग, अष्टपैलू डोसिंग, ऑन-डिमांड फ्लुइड रिलीझ, विश्वासार्ह ऑपरेशन (उदा., पर्यावरणीय कंपनास असंवेदनशीलता) आणि दीर्घकालीन स्टोरेजसह अचूक द्रव प्रवाह नियंत्रण प्रदान करते.FAST-POCT प्लॅटफॉर्ममध्ये चार स्तर असतात: बॅकिंग लेयर, एक लवचिक फिल्म लेयर, प्लास्टिक फिल्म लेयर आणि कव्हर लेयर, अंजीर 1b मध्ये विस्तारित दृश्यात दर्शविल्याप्रमाणे (पूरक आकृती S1 आणि S2 मध्ये देखील तपशीलवार दर्शविले आहे. ).सर्व वाहिन्या आणि द्रव वाहतूक कक्ष (जसे की प्री-स्टोरेज आणि रिॲक्शन चेंबर्स) 0.2 मिमी (सर्वात पातळ भाग) ते 5 मिमी जाडीच्या PLA (पॉलिलेक्टिक ऍसिड) सब्सट्रेट्समध्ये एम्बेड केलेले आहेत.लवचिक फिल्म मटेरियल हे 300 µm जाडीचे PDMS आहे जे त्याच्या “पातळ जाडी” आणि कमी लवचिकतेमुळे (सुमारे 2.25 MPa47) हवेचा दाब लागू केल्यावर सहज विस्तारते.पॉलीथिलीन फिल्म लेयर 100 µm जाडी असलेल्या पॉलीथिलीन टेरेफ्थालेट (PET) चा बनलेला असतो ज्यामुळे हवेच्या दाबामुळे लवचिक फिल्मचे जास्त विकृती होण्यापासून संरक्षण होते.चेंबर्सशी संबंधित, सब्सट्रेट लेयरमध्ये द्रव प्रवाह नियंत्रित करण्यासाठी कव्हर लेयर (पीएलए बनलेले) शी जोडलेले लीव्हर असतात.दुहेरी बाजू असलेला चिकट टेप (ARseal 90880) वापरून लवचिक फिल्म बॅकिंग लेयरवर चिकटलेली होती आणि प्लास्टिक फिल्मने झाकलेली होती.कव्हर लेयरमध्ये टी-क्लिप डिझाइन वापरून सब्सट्रेटवर तीन स्तर एकत्र केले गेले.टी-क्लॅम्पमध्ये दोन पायांमध्ये अंतर असते.जेव्हा क्लिप खोबणीमध्ये घातली गेली तेव्हा दोन्ही पाय थोडेसे वाकले, नंतर त्यांच्या मूळ स्थितीत परत आले आणि खोबणीतून जाताना झाकण आणि बॅकिंग घट्ट बांधले (पूरक अंजीर. S1).त्यानंतर कनेक्टर वापरून चार स्तर एकत्र केले जातात.
FAST चे विविध कार्यात्मक कंपार्टमेंट आणि वैशिष्ट्ये दर्शविणारा प्लॅटफॉर्मचा योजनाबद्ध आकृती.b FAST-POCT प्लॅटफॉर्मचा विस्तारित आकृती.c यूएस चतुर्थांश डॉलरच्या नाण्यापुढील प्लॅटफॉर्मचा फोटो.
फास्ट-पीओसीटी प्लॅटफॉर्मची कार्यरत यंत्रणा आकृती 2 मध्ये दर्शविली आहे. मुख्य घटक म्हणजे बेस लेयरवरील ब्लॉक्स आणि कव्हर लेयरवरील बिजागर, ज्याचा परिणाम टी-आकार वापरून चार स्तर एकत्र केल्यावर हस्तक्षेप डिझाइनमध्ये होतो. .जेव्हा हवेचा दाब लागू केला जात नाही (अंजीर 2a), हस्तक्षेप फिटमुळे बिजागर वाकतो आणि विकृत होतो आणि ब्लॉकच्या विरूद्ध लवचिक फिल्म दाबण्यासाठी लीव्हरद्वारे सीलिंग फोर्स लागू केला जातो आणि सील पोकळीतील द्रव परिभाषित केला जातो. सीलबंद राज्य म्हणून.हे लक्षात घ्यावे की या अवस्थेत, लीव्हर बाहेरून वाकलेला आहे, अंजीर 2a मधील बाजूच्या दृश्यात दर्शविल्याप्रमाणे.जेव्हा हवा पुरवठा केला जातो (चित्र 2b), लवचिक पडदा कव्हरच्या दिशेने बाहेर पसरतो आणि लीव्हरला वर ढकलतो, अशा प्रकारे पुढील चेंबरमध्ये द्रवपदार्थ वाहून जाण्यासाठी लीव्हर आणि ब्लॉकमधील अंतर उघडते, ज्याची व्याख्या ओपन स्टेट म्हणून केली जाते. .हवेचा दाब सोडल्यानंतर, लीव्हर त्याच्या मूळ स्थितीत परत येऊ शकतो आणि बिजागराच्या लवचिकतेमुळे घट्ट राहू शकतो.S1 या पूरक चित्रपटात लीव्हर हालचालींचे व्हिडिओ सादर केले आहेत.
A. बंद असताना योजनाबद्ध आकृती आणि छायाचित्रे.दबाव नसताना, लीव्हर ब्लॉकच्या विरूद्ध पडदा दाबतो आणि द्रव सील केला जातो.b चांगल्या स्थितीत.जेव्हा दाब लागू होतो, तेव्हा पडदा विस्तारतो आणि लीव्हरला वर ढकलतो, त्यामुळे वाहिनी उघडते आणि द्रव वाहू शकतो.c गंभीर दाबाचे वैशिष्ट्यपूर्ण आकार निश्चित करा.वैशिष्ट्यपूर्ण परिमाणांमध्ये लीव्हरची लांबी (एल), स्लाइडर आणि बिजागर (एल) मधील अंतर आणि लीव्हर प्रोट्र्यूजन (टी) ची जाडी समाविष्ट आहे.Fs हे थ्रॉटल पॉइंट B वरील कॉम्पॅक्शन फोर्स आहे. q हा लीव्हरवर एकसमान वितरीत केलेला भार आहे.Tx* हिंग्ड लीव्हरद्वारे विकसित टॉर्कचे प्रतिनिधित्व करतो.गंभीर दाब म्हणजे लीव्हर वाढवण्यासाठी आणि द्रव प्रवाहित करण्यासाठी आवश्यक असलेला दबाव.d गंभीर दाब आणि घटक आकार यांच्यातील संबंधांचे सैद्धांतिक आणि प्रायोगिक परिणाम.n = 6 स्वतंत्र प्रयोग केले गेले आणि डेटा ± मानक विचलन म्हणून दर्शविला गेला.कच्चा डेटा कच्चा डेटा फाइल्स म्हणून सादर केला जातो.
भौमितिक पॅरामीटर्सवर ज्या अंतरावर अंतर उघडते त्या क्रिटिकल प्रेशर पीसीच्या अवलंबनाचे विश्लेषण करण्यासाठी बीम सिद्धांतावर आधारित विश्लेषणात्मक मॉडेल विकसित केले गेले आहे (उदाहरणार्थ, L ही लीव्हरची लांबी आहे, l ब्लॉक आणि मधील अंतर आहे. बिजागर, S हे लीव्हर आहे द्रव टी सह संपर्क क्षेत्र म्हणजे लीव्हर प्रोट्र्यूजनची जाडी, चित्र 2c मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे).पूरक नोट्स आणि पूरक आकृती S3 मध्ये तपशीलवार सांगितल्याप्रमाणे, जेव्हा \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\), तेव्हा अंतर उघडते, जेथे Fs हा टॉर्क असतो \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) हस्तक्षेप फिटशी संबंधित बल काढून टाकण्यासाठी आणि बिजागर वाकण्यास कारणीभूत ठरण्यासाठी.प्रायोगिक प्रतिसाद आणि विश्लेषणात्मक मॉडेल चांगले सामंजस्य दाखवतात (चित्र 2d), हे दर्शविते की गंभीर दाब पीसी वाढत्या t/l आणि कमी L सह वाढते, जे शास्त्रीय बीम मॉडेलद्वारे सहजपणे स्पष्ट केले जाते, म्हणजे t/Lift सह टॉर्क वाढते. .अशाप्रकारे, आमचे सैद्धांतिक विश्लेषण स्पष्टपणे दर्शवते की लीव्हर लांबी L आणि t/l प्रमाण समायोजित करून गंभीर दाब प्रभावीपणे नियंत्रित केला जाऊ शकतो, जो FAST-POCT प्लॅटफॉर्मच्या डिझाइनसाठी एक महत्त्वाचा आधार प्रदान करतो.
फास्ट-पीओसीटी प्लॅटफॉर्म मल्टीफंक्शनल डिस्पेंसिंग (इनसेट आणि प्रयोगासह आकृती 3a मध्ये दर्शविलेले) प्रदान करते, जे यशस्वी पीओसीटीचे सर्वात महत्वाचे वैशिष्ट्य आहे, जेथे द्रव कोणत्याही दिशेने आणि कोणत्याही क्रमाने (कॅस्केड, एकाचवेळी, अनुक्रमिक) किंवा निवडक मल्टीचॅनेल प्रवाहित करू शकतात. वितरण- डोस फंक्शन.अंजीर वर.3a(i) एक कॅस्केड डोसिंग मोड दर्शविते ज्यामध्ये दोन किंवा अधिक चेंबर्स विविध अभिक्रियाकांना वेगळे करण्यासाठी ब्लॉक वापरून कॅस्केड केले जातात आणि खुल्या आणि बंद स्थितींवर नियंत्रण ठेवण्यासाठी एक लीव्हर.जेव्हा दाब लागू केला जातो तेव्हा द्रव कॅस्केड पद्धतीने वरच्या खोलीतून खालच्या चेंबरकडे वाहतो.हे लक्षात घ्यावे की कॅस्केड चेंबर ओले रसायनांनी किंवा कोरड्या रसायनांनी भरले जाऊ शकतात जसे की लिओफिलाइज्ड पावडर.आकृती 3a(i) मधील प्रयोगात, वरच्या चेंबरमधील लाल शाई निळ्या डाई पावडरसह (तांबे सल्फेट) दुसऱ्या चेंबरमध्ये वाहते आणि खालच्या चेंबरमध्ये पोहोचल्यावर गडद निळ्या रंगात बदलते.हे पंप केल्या जाणाऱ्या द्रवासाठी नियंत्रण दाब देखील दर्शविते.त्याचप्रमाणे, जेव्हा एक लीव्हर दोन चेंबर्सशी जोडलेला असतो, तेव्हा तो अंजीरमध्ये दर्शविल्याप्रमाणे एकाचवेळी इंजेक्शन मोड बनतो.3a(ii), ज्यामध्ये दाब लागू केल्यावर द्रव दोन किंवा अधिक चेंबर्सवर समान रीतीने वितरित केला जाऊ शकतो.गंभीर दाब लीव्हरच्या लांबीवर अवलंबून असल्याने, अंजीरमध्ये दर्शविल्याप्रमाणे अनुक्रमिक इंजेक्शन पॅटर्न प्राप्त करण्यासाठी लीव्हरची लांबी समायोजित केली जाऊ शकते.3a(iii).एक लांब लीव्हर (गंभीर दाब Pc_long सह) चेंबर B शी जोडलेला होता आणि एक लहान लीव्हर (गंभीर दाब Pc_short > Pc_long सह) चेंबर A शी जोडलेला होता. दाब P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) लागू केल्यामुळे, फक्त लाल रंगात द्रव होता. चेंबर B मध्ये प्रवाहित होऊ शकतो आणि जेव्हा दाब P2 (> Pc_short) पर्यंत वाढवला जातो तेव्हा निळा द्रव चेंबर A मध्ये वाहू शकतो. हा अनुक्रमिक इंजेक्शन मोड वेगवेगळ्या द्रव्यांना त्यांच्या संबंधित चेंबरमध्ये क्रमाने हस्तांतरित करण्यासाठी लागू होतो, जो यशस्वी POCT साठी महत्त्वपूर्ण आहे डिव्हाइस.एक लांब लीव्हर (गंभीर दाब Pc_long सह) चेंबर B शी जोडलेला होता आणि एक लहान लीव्हर (गंभीर दाब Pc_short > Pc_long सह) चेंबर A शी जोडलेला होता. दाब P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) लागू केल्यामुळे, फक्त लाल रंगात द्रव होता. चेंबर B मध्ये प्रवाहित होऊ शकतो आणि जेव्हा दाब P2 (> Pc_short) पर्यंत वाढवला जातो तेव्हा निळा द्रव चेंबर A मध्ये वाहू शकतो. हा अनुक्रमिक इंजेक्शन मोड वेगवेगळ्या द्रव्यांना त्यांच्या संबंधित चेंबरमध्ये क्रमाने हस्तांतरित करण्यासाठी लागू होतो, जो यशस्वी POCT साठी महत्त्वपूर्ण आहे डिव्हाइस.Длинный рычаг (с критическим давлением Pc_long) был соединен с камерой B, а короткий рычаг (с критическим давлением Pc_long Pc_long) с камерой A. При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) только жидкость, выделенная красным может течь в камеру B, и когда давление было увеличено до P2 (> Pc_short), синяя жидкость может течь в камеру A я к различным жидкостям, последовательно перемещаемым в соответствующие камеры, что имеет решающее значение дл.एक लांब लीव्हर (गंभीर दाब Pc_long सह) चेंबर B शी जोडलेला होता, आणि एक लहान लीव्हर (गंभीर दाब Pc_short > Pc_long सह) चेंबर A शी जोडलेला होता. जेव्हा दाब P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) लागू केला जातो तेव्हा फक्त द्रव हायलाइट केला जातो. लाल रंगात चेंबर B मध्ये प्रवाही होऊ शकतो आणि जेव्हा दाब P2 (> Pc_short) पर्यंत वाढवला जातो तेव्हा निळा द्रव चेंबर A मध्ये वाहू शकतो. हा अनुक्रमिक इंजेक्शन मोड अनुक्रमे संबंधित चेंबरमध्ये हस्तांतरित केल्या जाणाऱ्या वेगवेगळ्या द्रवांवर लागू केला जातो, जो गंभीर आहे यशस्वी POCT साठी.डिव्हाइस. Длинный рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камерой B, а короткий рычаг (критическое давление Pc_short) > Pc_long.लांब हात (गंभीर दाब Pc_long) चेंबर B शी जोडलेला असतो आणि लहान हात (गंभीर दाब Pc_short > Pc_long) चेंबर A शी जोडलेला असतो.При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) एक может поступать синяя жидкость.जेव्हा दाब P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) लागू केला जातो तेव्हा फक्त लाल द्रव चेंबर B मध्ये प्रवेश करू शकतो आणि जेव्हा P2 (> Pc_short) दाब वाढवला जातो तेव्हा निळा द्रव चेंबर A मध्ये प्रवेश करू शकतो. हा अनुक्रमिक इंजेक्शन मोड अनुक्रमिक हस्तांतरणासाठी योग्य आहे संबंधित चेंबरमध्ये विविध द्रवपदार्थ, जे POCT उपकरणाच्या यशस्वी ऑपरेशनसाठी महत्त्वपूर्ण आहे.आकृती 3a(iv) निवडक इंजेक्शन मोड दर्शविते, जेथे मुख्य चेंबरमध्ये लहान (गंभीर दाब Pc_short सह) आणि एक लांब लीव्हर (गंभीर दाब Pc_long < Pc_short सह) चेंबर A आणि चेंबर B शी जोडलेले होते, त्याव्यतिरिक्त, चेंबर B शी जोडलेल्या दुसऱ्या एअर चॅनेलवर. प्रथम द्रव चेंबर A मध्ये स्थानांतरित करण्यासाठी, P1 + P2 > Pc_short सह P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) आणि P2 (P2 > P1) दाब एकाच वेळी डिव्हाइसवर लागू केला गेला.आकृती 3a(iv) निवडक इंजेक्शन मोड दर्शविते, जेथे मुख्य चेंबरमध्ये लहान (गंभीर दाब Pc_short सह) आणि एक लांब लीव्हर (गंभीर दाब Pc_long < Pc_short सह) चेंबर A आणि चेंबर B शी जोडलेले होते, त्याव्यतिरिक्त, चेंबर B शी जोडलेल्या दुसऱ्या एअर चॅनेलवर. प्रथम द्रव चेंबर A मध्ये स्थानांतरित करण्यासाठी, P1 + P2 > Pc_short सह P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) आणि P2 (P2 > P1) दाब एकाच वेळी डिव्हाइसवर लागू केला गेला.अंजीर वर.3a(iv) показан режим селективного впрыска, при котором основная камера имела короткий (с критическим давлением Pc_short) давлением Pc_long < Pc_short), которые дополнительно соединялись с камерой A и камерой B соответственно.3a(iv) निवडक इंजेक्शन मोड दर्शविते, ज्यामध्ये मुख्य चेंबरमध्ये लहान (गंभीर दाब Pc_short सह) आणि एक लांब लीव्हर (गंभीर दाब Pc_long < Pc_short सह), जे चेंबर A आणि चेंबर B शी जोडलेले होते.к другому воздушному каналу, соединному с камерой बी (Pc_long < P1 < Pc_short) и P2 (P2 > P1), где P1 + P2 > Pc_short.चेंबर B शी जोडलेल्या दुसऱ्या एअर चॅनेलला. प्रथम द्रवपदार्थ चेंबर A मध्ये स्थानांतरित करण्यासाठी, P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) आणि P2 (P2 > P1) दाब एकाच वेळी डिव्हाइसवर लागू केले गेले, जेथे P1 + P2 > Pc_short. 3a (iv) показан режим селективного впрыска, когда основная камера имеет короткий стержень (с критическим давлением давлением давлением) Pc тическим давлением Pc_long < Pc_short), соединенные с камерой A и камерой B соответственно, и в дополнение к друголнение , другомудукамука подключенному к комнате B.3a(iv) निवडक इंजेक्शन मोड दर्शवितो जेव्हा मुख्य चेंबरमध्ये एक लहान स्टेम (गंभीर दाब Pc_short) आणि एक लांब स्टेम (गंभीर दाब Pc_long < Pc_short) चेंबर A आणि चेंबर B शी जोडलेला असतो, आणि दुसर्या एअर पॅसेज व्यतिरिक्त, खोली B शी जोडलेले.अशा प्रकारे, पी 2 द्रव चेंबर बी मध्ये प्रवेश करण्यापासून प्रतिबंधित करते;दरम्यान, एकूण दाब P1 + P2 चेंबर A ला जोडलेले लहान लीव्हर सक्रिय करण्यासाठी चेंबर A मध्ये द्रव प्रवाह करण्यास परवानगी देण्यासाठी गंभीर दाब ओलांडले. नंतर, जेव्हा चेंबर B भरणे आवश्यक होते, तेव्हा आम्हाला फक्त P1 (Pc_long <) लागू करणे आवश्यक आहे. P1 < Pc_short) मुख्य चेंबरमध्ये लांब लीव्हर सक्रिय करण्यासाठी आणि द्रव चेंबर B मध्ये वाहू द्या. हे स्पष्टपणे लक्षात येते की t = 3 s ते 9 s दरम्यान चेंबर A मधील द्रव चेंबरमध्ये वाढत असताना स्थिर राहिला. B जेव्हा दाब P1 लागू केला गेला.दरम्यान, एकूण दाब P1 + P2 चेंबर A ला जोडलेले लहान लीव्हर सक्रिय करण्यासाठी चेंबर A मध्ये द्रव प्रवाह करण्यास परवानगी देण्यासाठी गंभीर दाब ओलांडले. नंतर, जेव्हा चेंबर B भरणे आवश्यक होते, तेव्हा आम्हाला फक्त P1 (Pc_long <) लागू करणे आवश्यक आहे. P1 < Pc_short) मुख्य चेंबरमध्ये लांब लीव्हर सक्रिय करण्यासाठी आणि द्रव चेंबर B मध्ये वाहू द्या. हे स्पष्टपणे लक्षात येते की t = 3 s ते 9 s दरम्यान चेंबर A मधील द्रव चेंबरमध्ये वाढत असताना स्थिर राहिला. B जेव्हा दाब P1 लागू केला गेला.Между тем, общее давление P1 + P2 превысило критическое давление, чтобы активировать более короткий рычаг, сноевказобый рычаг лить жидкости течь в камеру A. Затем, когда требуется заполнить камеру B, нам нужно только применить P1 (Pc_long < P1 < Phort ) в основной камере, чтобы активировать длинный рычаг и дать жидкости течь в камеру B дкость в камере एक оставалась постоянной, в то время как в камере она увеличивалась.दरम्यान, एकूण दाब P1 + P2 ने चेंबर A शी जोडलेला लहान लीव्हर सक्रिय करण्यासाठी गंभीर दाब ओलांडला आहे जेणेकरुन द्रव चेंबर A मध्ये वाहू शकेल. नंतर जेव्हा चेंबर B भरण्याची आवश्यकता असेल तेव्हा आम्हाला फक्त P1 (Pc_long < P1) लागू करणे आवश्यक आहे. < Pc_short ) मुख्य चेंबरमध्ये लांब लीव्हर सक्रिय करण्यासाठी आणि द्रव चेंबर B मध्ये वाहू द्या. हे स्पष्टपणे पाहिले जाऊ शकते की t = 3 s आणि 9 s दरम्यान चेंबर A मध्ये द्रव स्थिर राहिला, तर चेंबरमध्ये तो वाढला.B जेव्हा दाब P1 लागू केला जातो.त्याच वेळी, एकूण दाब P1 + P2 गंभीर दाबापेक्षा जास्त आहे, लहान लीव्हर जोडणारा चेंबर A ला कार्यान्वित करतो, ज्यामुळे द्रव चेंबर A मध्ये वाहू शकतो.जेव्हा चेंबर A भरण्याची वेळ येते तेव्हा आम्ही फक्त P1 मुख्य चेंबरमध्ये आणि P2 दुय्यम चेंबरमध्ये लागू करतो.अशा प्रकारे, कॅमेरे A आणि B मध्ये प्रवाहाचे वर्तन निवडकपणे स्विच केले जाऊ शकते. चार बहु-कार्यात्मक वितरण मोडचे प्रवाह वर्तन पूरक चित्रपट S2 मध्ये आढळू शकते.
मल्टीफंक्शनल असाइनमेंटचे उदाहरण, म्हणजे (i) कॅस्केडिंग, (ii) एकाचवेळी, (iii) अनुक्रमिक आणि (iv) निवडक असाइनमेंट.वक्र या चार वितरण मोडचे वर्कफ्लो आणि पॅरामीटर्स दर्शवतात.b डीआयोनाइज्ड पाणी आणि इथेनॉलमध्ये दीर्घकालीन स्टोरेज चाचण्यांचे परिणाम.n = 5 स्वतंत्र प्रयोग केले गेले आणि डेटा ± sd c म्हणून दर्शविला गेला.FAST उपकरण आणि केशिका झडप (CV) उपकरण (i) स्थिर आणि (ii) कंपन अवस्थेत असताना स्थिरता चाचणी प्रात्यक्षिके.(iii) FAST आणि CV उपकरणांसाठी व्हॉल्यूम विरुद्ध वेळ विविध कोनीय फ्रिक्वेन्सीवर.d (i) फास्ट उपकरण आणि (ii) CV उपकरणाच्या मागणीनुसार चाचणी परिणामांचे प्रकाशन.(iii) अधूनमधून दाब मोड वापरून FAST आणि CV उपकरणांसाठी आवाज आणि वेळ यांच्यातील संबंध.सर्व स्केल बार, 1 सें.मी.कच्चा डेटा कच्चा डेटा फाइल्स म्हणून प्रदान केला जातो.
अभिकर्मकांचे दीर्घकालीन संचयन हे यशस्वी POCT उपकरणाचे आणखी एक महत्त्वाचे वैशिष्ट्य आहे जे अप्रशिक्षित कर्मचाऱ्यांना एकाधिक अभिकर्मक हाताळू देते.बऱ्याच तंत्रज्ञानाने दीर्घकालीन स्टोरेजसाठी त्यांची क्षमता दर्शविली आहे (उदा., 35 मायक्रोडिस्पेंसर, 48 ब्लिस्टर पॅक आणि 49 स्टिक पॅक), पॅकेज सामावून घेण्यासाठी एक समर्पित रिसीव्हिंग कंपार्टमेंट आवश्यक आहे, ज्यामुळे किंमत आणि जटिलता वाढते;शिवाय, या स्टोरेज यंत्रणा मागणीनुसार वितरणास परवानगी देत ​​नाहीत आणि परिणामी पॅकेजिंगमध्ये उरलेल्या घटकांमुळे अभिकर्मकांचा अपव्यय होतो.CNC-मशीन PMMA सामग्रीचा वापर करून प्रवेगक जीवन चाचणी आयोजित करून दीर्घकालीन स्टोरेज क्षमतेची पडताळणी केली गेली कारण त्याचा थोडासा खडबडीतपणा आणि गॅस झिरपण्याच्या प्रतिकारामुळे (पूरक आकृती S5).चाचणी यंत्र 9 दिवसांसाठी 65°C तापमानावर डीआयोनाइज्ड पाणी (डीआयनाइज्ड पाणी) आणि 70% इथेनॉल (नक्कल करणारे वाष्पशील अभिकर्मक) भरले होते.वरून प्रवेश अवरोधित करण्यासाठी ॲल्युमिनियम फॉइल वापरून डीआयोनाइज्ड पाणी आणि इथेनॉल दोन्ही साठवले गेले.50,51 साहित्यात नोंदवलेले अरहेनियस समीकरण आणि पेनिट्रेशन ऍक्टिव्हेशन एनर्जी रिअल-टाइम समतुल्य मोजण्यासाठी वापरली गेली.अंजीर वर.3b 9 दिवसांसाठी 65°C वर साठवून ठेवलेल्या 5 नमुन्यांचे सरासरी वजन कमी परिणाम दर्शविते, 23°C वर 2 वर्षांसाठी 0.30% आणि 70% इथेनॉलसाठी 0.72% समतुल्य.
अंजीर वर.3c कंपन चाचणी दाखवते.विद्यमान POCT28,29 उपकरणांमध्ये केशिका झडप (CV) ही द्रव हाताळणीची सर्वात लोकप्रिय पद्धत असल्याने, तुलना करण्यासाठी 300 µm रुंद आणि 200 µm खोल असलेले CV उपकरण वापरले गेले.हे पाहिले जाऊ शकते की जेव्हा दोन्ही उपकरणे स्थिर राहतात, तेव्हा FAST-POCT प्लॅटफॉर्म सीलमधील द्रव आणि CV डिव्हाइसमधील द्रव अचानक चॅनेलच्या विस्तारामुळे लॉक होतो, ज्यामुळे केशिका शक्ती कमी होते.तथापि, ऑर्बिटल व्हायब्रेटरची कोनीय वारंवारता वाढते म्हणून, FAST-POCT प्लॅटफॉर्ममधील द्रव सीलबंद राहतो, परंतु CV उपकरणातील द्रव खालच्या चेंबरमध्ये वाहतो (सप्लिमेंटरी मूव्ही S3 देखील पहा).हे सूचित करते की FAST-POCT प्लॅटफॉर्मचे विकृत बिजागर चेंबरमधील द्रव घट्टपणे बंद करण्यासाठी मॉड्यूलवर एक मजबूत यांत्रिक शक्ती लागू करू शकतात.तथापि, सीव्ही उपकरणांमध्ये, घन, हवा आणि द्रव टप्प्यांमधील संतुलनामुळे द्रव राखून ठेवला जातो, अस्थिरता निर्माण होते आणि कंपनांमुळे संतुलन बिघडू शकते आणि अनपेक्षित प्रवाह वर्तन होऊ शकते.FAST-POCT प्लॅटफॉर्मचा फायदा असा आहे की ते विश्वसनीय कार्यक्षमता प्रदान करते आणि सामान्यतः वितरण आणि ऑपरेशन दरम्यान उद्भवणाऱ्या कंपनांच्या उपस्थितीत अपयश टाळते.
फास्ट-पीओसीटी प्लॅटफॉर्मचे आणखी एक महत्त्वाचे वैशिष्ट्य म्हणजे त्याचे ऑन-डिमांड प्रकाशन, जे परिमाणात्मक विश्लेषणासाठी मुख्य आवश्यकता आहे.अंजीर वर.3d FAST-POCT प्लॅटफॉर्म आणि CV डिव्हाइसच्या मागणीनुसार रिलीझची तुलना करते.अंजीर पासून.3d(iii) आम्ही पाहतो की FAST उपकरण प्रेशर सिग्नलला त्वरीत प्रतिसाद देते.जेव्हा FAST-POCT प्लॅटफॉर्मवर दबाव लागू केला गेला तेव्हा द्रव प्रवाहित झाला, जेव्हा दाब सोडला गेला तेव्हा प्रवाह ताबडतोब थांबला (Fig. 3d(i)).ही क्रिया बिजागराच्या द्रुत लवचिक रिटर्नद्वारे स्पष्ट केली जाऊ शकते, जी लीव्हरला ब्लॉकच्या विरूद्ध दाबते, चेंबर बंद करते.तथापि, CV यंत्रामध्ये द्रव प्रवाह चालूच राहिला, परिणामी दबाव सोडल्यानंतर अंदाजे 100 μl च्या अनपेक्षित द्रवपदार्थाची मात्रा निर्माण झाली (आकृती 3d(ii) आणि पूरक चित्रपट S4).पहिल्या इंजेक्शननंतर सीव्ही पूर्ण ओले झाल्यावर केशिका पिनिंग प्रभाव गायब झाल्यामुळे हे स्पष्ट केले जाऊ शकते.
POCT ऍप्लिकेशन्ससाठी एकाच यंत्रामध्ये विविध ओलेपणा आणि चिकटपणाचे द्रव हाताळण्याची क्षमता एक आव्हान आहे.खराब ओलेपणामुळे चॅनेलमध्ये गळती किंवा इतर अनपेक्षित प्रवाह वर्तन होऊ शकते आणि व्हर्टेक्स मिक्सर, सेंट्रीफ्यूज आणि फिल्टर यांसारखी सहायक उपकरणे अनेकदा अत्यंत चिकट द्रव तयार करण्यासाठी आवश्यक असतात 52.आम्ही गंभीर दाब आणि द्रव गुणधर्मांमधील संबंध तपासले (विस्तृत ओलेपणा आणि चिकटपणासह).परिणाम तक्ता 1 आणि व्हिडिओ S5 मध्ये दर्शविले आहेत.हे पाहिले जाऊ शकते की चेंबरमध्ये भिन्न ओलेपणा आणि चिकटपणाचे द्रव सील केले जाऊ शकतात आणि जेव्हा दबाव लागू केला जातो तेव्हा 5500 सीपी पर्यंत चिकटपणा असलेले द्रव देखील जवळच्या चेंबरमध्ये स्थानांतरित केले जाऊ शकतात, ज्यामुळे उच्च पातळीचे नमुने शोधणे शक्य होते. स्निग्धता (म्हणजे थुंकी, श्वसन रोगांच्या निदानासाठी वापरला जाणारा अतिशय चिकट नमुना).
वरील मल्टिफंक्शनल डिस्पेन्सिंग उपकरणे एकत्र करून, फास्ट-आधारित POCT उपकरणांची विस्तृत श्रेणी विकसित केली जाऊ शकते.आकृती 1 मध्ये एक उदाहरण दर्शविले आहे. वनस्पतीमध्ये प्री-स्टोरेज चेंबर, एक मिक्सिंग चेंबर, एक प्रतिक्रिया कक्ष आणि एक कचरा चेंबर आहे.अभिकर्मक प्री-स्टोरेज चेंबरमध्ये विस्तारित कालावधीसाठी साठवले जाऊ शकतात आणि नंतर मिक्सिंग चेंबरमध्ये सोडले जाऊ शकतात.योग्य दाबाने, मिश्रित अभिक्रियाकांना निवडकपणे कचरा चेंबर किंवा प्रतिक्रिया चेंबरमध्ये स्थानांतरित केले जाऊ शकते.
कारण H1N1 आणि COVID-19 सारख्या रोगजनकांचा शोध घेण्यासाठी PCR शोध हे सुवर्ण मानक आहे आणि त्यात अनेक प्रतिक्रिया चरणांचा समावेश आहे, आम्ही PCR शोधण्यासाठी FAST-POCT प्लॅटफॉर्मचा वापर अनुप्रयोग म्हणून केला.अंजीर वर.4 फास्ट-पीओसीटी प्लॅटफॉर्म वापरून पीसीआर चाचणी प्रक्रिया दर्शविते.प्रथम, एल्युटिंग अभिकर्मक, चुंबकीय मायक्रोबीड अभिकर्मक, वॉश सोल्यूशन A आणि वॉश सोल्यूशन W अनुक्रमे पूर्व-स्टोरेज चेंबर्स E, M, W1 आणि W2 मध्ये पिपेट केले गेले.आरएनए शोषणाचे टप्पे अंजीर मध्ये दर्शविले आहेत.4a आणि खालीलप्रमाणे आहेत: (1) जेव्हा दाब P1 (=0.26 बार) लागू केला जातो, तेव्हा नमुना चेंबर M मध्ये जातो आणि मिक्सिंग चेंबरमध्ये सोडला जातो.(2) हवेचा दाब P2 (= 0.12 बार) मिक्सिंग चेंबरच्या तळाशी जोडलेल्या पोर्ट A द्वारे पुरवला जातो.POCT प्लॅटफॉर्मवर अनेक मिश्रण पद्धतींनी द्रव मिसळण्याची क्षमता दर्शविली असली तरी (उदा. सर्पेन्टाइन मिक्सिंग 53, रँडम मिक्सिंग 54 आणि बॅच मिक्सिंग 55), त्यांची मिक्सिंग कार्यक्षमता आणि परिणामकारकता अजूनही समाधानकारक नाही.हे बबल मिक्सिंग पद्धतीचा अवलंब करते, ज्यामध्ये द्रव मध्ये बुडबुडे तयार करण्यासाठी मिक्सिंग चेंबरच्या तळाशी हवा दाखल केली जाते, त्यानंतर शक्तिशाली भोवरा काही सेकंदात संपूर्ण मिश्रण प्राप्त करू शकतो.बबल मिक्सिंग प्रयोग केले गेले आणि परिणाम पूरक आकृती S6 मध्ये सादर केले गेले.हे पाहिले जाऊ शकते की जेव्हा 0.10 बारचा दाब लागू केला जातो तेव्हा संपूर्ण मिश्रण सुमारे 8 सेकंद घेते.दाब 0.20 बार पर्यंत वाढवून, संपूर्ण मिश्रण सुमारे 2 सेकंदात प्राप्त होते.मिक्सिंग कार्यक्षमतेची गणना करण्याच्या पद्धती पद्धती विभागात सादर केल्या आहेत.(३) मणी काढण्यासाठी रुबिडियम चुंबकाचा वापर करा, त्यानंतर अभिकर्मकांना कचरा चेंबरमध्ये हलवण्यासाठी P3 (= 0.17 बार) पोर्ट P द्वारे दाबा.अंजीर वर.4b,c खालीलप्रमाणे नमुन्यातील अशुद्धता काढून टाकण्यासाठी वॉशिंग पायऱ्या दर्शविते: (1) चेंबर W1 मधील वॉशिंग सोल्यूशन A चेंबर P1 मिक्सिंग चेंबरमध्ये सोडले जाते.(२) नंतर बबल मिसळण्याची प्रक्रिया करा.(3) वॉशिंग सोल्यूशन A कचरा द्रव चेंबरमध्ये हस्तांतरित केले जाते आणि मिक्सिंग चेंबरमधील मायक्रोबीड्स चुंबकाद्वारे बाहेर काढले जातात.W (Fig. 4c) धुणे A (Fig. 4b) धुण्यासारखे होते.हे लक्षात घ्यावे की प्रत्येक वॉशिंग चरण A आणि W दोनदा केले गेले.आकृती 4d मणींमधून आरएनए काढण्यासाठी उत्सर्जनाच्या पायऱ्या दाखवते;उत्सर्जन आणि मिश्रण परिचय चरण वर वर्णन केलेल्या आरएनए शोषण आणि धुण्याच्या चरणांप्रमाणेच आहेत.P3 आणि P4 (=0.23 बार) या दाबांखाली इल्युशन अभिकर्मक PCR प्रतिक्रिया चेंबरमध्ये हस्तांतरित केल्यामुळे, PCR प्रतिक्रिया कक्षाच्या हाताला सील करण्यासाठी गंभीर दाब गाठला जातो.त्याचप्रमाणे, P4 दाब देखील कचरा चेंबरकडे जाणारा रस्ता सील करण्यास मदत करते.अशा प्रकारे, मल्टीप्लेक्स पीसीआर प्रतिक्रिया सुरू करण्यासाठी सर्व इल्युशन अभिकर्मक चार पीसीआर प्रतिक्रिया कक्षांमध्ये समान रीतीने वितरीत केले गेले.वरील प्रक्रिया सप्लिमेंटरी मूव्ही S6 मध्ये सादर केली आहे.
RNA शोषण चरणात, नमुना इनलेट M मध्ये आणला जातो आणि पूर्वी साठवलेल्या मणीच्या द्रावणासह मिक्सिंग चेंबरमध्ये इंजेक्ट केला जातो.ग्रॅन्युल मिसळल्यानंतर आणि काढून टाकल्यानंतर, अभिकर्मक कचरा चेंबरमध्ये वितरीत केले जातात.b आणि c वॉश स्टेप्स, मिक्सिंग चेंबरमध्ये विविध पूर्व-संचयित वॉश अभिकर्मकांचा समावेश करा आणि मणी मिसळल्यानंतर आणि काढून टाकल्यानंतर, अभिकर्मक कचरा द्रव चेंबरमध्ये स्थानांतरित करा.d इल्युशन पायरी: इल्युशन अभिकर्मक, मिक्सिंग आणि बीड एक्सट्रॅक्शन सादर केल्यानंतर, अभिकर्मक PCR प्रतिक्रिया कक्ष मध्ये हस्तांतरित केले जातात.वक्र विविध टप्प्यांचे कार्यप्रवाह आणि संबंधित मापदंड दर्शवतात.प्रेशर म्हणजे वैयक्तिक चेंबर्समधून येणारा दबाव.व्हॉल्यूम हे मिक्सिंग चेंबरमधील द्रवाचे प्रमाण आहे.सर्व स्केल बार 1 सें.मी.कच्चा डेटा कच्चा डेटा फाइल्स म्हणून प्रदान केला जातो.
एक पीसीआर चाचणी प्रक्रिया केली गेली आणि पूरक आकृती S7 थर्मल प्रोफाइल सादर करते ज्यात 20 मिनिटे रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन वेळ आणि 60 मिनिटे थर्मल सायकलिंग वेळ (95 आणि 60 °C), एक थर्मल सायकल 90 s (पूरक चित्रपट S7) आहे..FAST-POCT ला पारंपारिक RT-PCR (एका थर्मल सायकलसाठी 180 सेकंद) पेक्षा एक थर्मल सायकल (90 सेकंद) पूर्ण करण्यासाठी कमी वेळ लागतो.हे उच्च पृष्ठभागाचे क्षेत्रफळ ते व्हॉल्यूम गुणोत्तर आणि सूक्ष्म-पीसीआर प्रतिक्रिया कक्षातील कमी थर्मल जडत्वाद्वारे स्पष्ट केले जाऊ शकते.चेंबरची पृष्ठभाग 96.6 mm2 आहे आणि चेंबरची मात्रा 25 mm3 आहे, ज्यामुळे पृष्ठभाग ते आवाजाचे प्रमाण अंदाजे 3.86 आहे.पुरवणी आकृती S10 मध्ये पाहिल्याप्रमाणे, आमच्या प्लॅटफॉर्मच्या PCR चाचणी क्षेत्रामध्ये मागील पॅनेलवर एक खोबणी आहे, ज्यामुळे PCR चेंबरचा तळ 200 µm जाड होतो.तपमान नियंत्रकाच्या गरम पृष्ठभागावर थर्मली प्रवाहकीय लवचिक पॅड जोडलेले आहे, जे चाचणी बॉक्सच्या मागील भागाशी घट्ट संपर्क सुनिश्चित करते.यामुळे प्लॅटफॉर्मची थर्मल जडत्व कमी होते आणि हीटिंग/कूलिंग कार्यक्षमता सुधारते.थर्मल सायकलिंग दरम्यान, प्लॅटफॉर्ममध्ये एम्बेड केलेले पॅराफिन वितळते आणि पीसीआर प्रतिक्रिया चेंबरमध्ये वाहते, अभिकर्मक बाष्पीभवन आणि पर्यावरणीय दूषित होण्यापासून रोखण्यासाठी सीलंट म्हणून काम करते (पूरक चित्रपट S8 पहा).
वर वर्णन केलेल्या सर्व PCR शोध प्रक्रिया कस्टम मेड FAST-POCT इन्स्ट्रुमेंट वापरून पूर्णपणे स्वयंचलित होत्या, ज्यामध्ये प्रोग्राम केलेले दाब नियंत्रण युनिट, चुंबकीय निष्कर्षण युनिट, तापमान नियंत्रण युनिट आणि फ्लोरोसेंट सिग्नल कॅप्चर आणि प्रोसेसिंग युनिट समाविष्ट होते.लक्षात ठेवा, आम्ही RNA अलगावसाठी FAST-POCT प्लॅटफॉर्म वापरला आणि नंतर तुलना करण्यासाठी FAST-POCT प्रणाली आणि डेस्कटॉप PCR प्रणाली वापरून PCR प्रतिक्रियांसाठी काढलेले RNA नमुने वापरले.परिपूरक आकृती S8 मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे परिणाम जवळजवळ समान होते.ऑपरेटर एक साधे कार्य करतो: एम-चेंबरमध्ये नमुना सादर करतो आणि इन्स्ट्रुमेंटमध्ये प्लॅटफॉर्म घालतो.परिमाणात्मक चाचणी परिणाम सुमारे 82 मिनिटांत उपलब्ध होतात.FAST-POCT साधनांबद्दल तपशीलवार माहिती पुरवणी आकृतीमध्ये आढळू शकते.C9, C10 आणि C11.
इन्फ्लूएंझा A (IAV), B (IBV), C (ICV) आणि D (IDV) विषाणूंमुळे होणारा इन्फ्लूएंझा ही एक सामान्य जागतिक घटना आहे.यापैकी, IAV आणि IBV सर्वात गंभीर प्रकरणे आणि हंगामी महामारीसाठी जबाबदार आहेत, जगातील 5-15% लोकसंख्येला संक्रमित करतात, ज्यामुळे 3-5 दशलक्ष गंभीर प्रकरणे होतात आणि दरवर्षी 290,000-650,000 मृत्यू होतात.श्वसन रोग 56,57.विकृती आणि संबंधित आर्थिक भार कमी करण्यासाठी IAV आणि IB चे लवकर निदान आवश्यक आहे.उपलब्ध निदान तंत्रांपैकी, रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेज पॉलिमरेझ चेन रिएक्शन (RT-PCR) ही सर्वात संवेदनशील, विशिष्ट आणि अचूक (>99%)58,59 मानली जाते.उपलब्ध निदान तंत्रांपैकी, रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेज पॉलिमरेझ चेन रिएक्शन (RT-PCR) ही सर्वात संवेदनशील, विशिष्ट आणि अचूक (>99%)58,59 मानली जाते.Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетевлеция чной и точной (> 99%)58,59.उपलब्ध निदान पद्धतींपैकी, रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेज पॉलिमरेज चेन रिएक्शन (RT-PCR) ही सर्वात संवेदनशील, विशिष्ट आणि अचूक (> 99%)58,59 मानली जाते. Из доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетется цепностических , й и точной (>99%)58,59.उपलब्ध निदान पद्धतींपैकी, रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेज पॉलिमरेज चेन रिएक्शन (RT-PCR) ही सर्वात संवेदनशील, विशिष्ट आणि अचूक (>99%)58,59 मानली जाते.तथापि, पारंपारिक RT-PCR पद्धतींमध्ये वारंवार पाइपिंग, मिक्सिंग, डिस्पेंसिंग आणि फ्लुइडचे हस्तांतरण आवश्यक असते, ज्यामुळे संसाधन-मर्यादित सेटिंग्जमध्ये व्यावसायिकांकडून त्यांचा वापर मर्यादित होतो.येथे, FAST-POCT प्लॅटफॉर्मचा वापर अनुक्रमे IAV आणि IBV च्या PCR डिटेक्शनसाठी, त्यांची कमी तपासण्याची मर्यादा (LOD) प्राप्त करण्यासाठी केला गेला.या व्यतिरिक्त, IAV आणि IBV विविध प्रजातींमधील विविध पॅथोटाइपमध्ये भेदभाव करण्यासाठी मल्टीप्लेक्स केले गेले आहेत, जे अनुवांशिक विश्लेषणासाठी एक आशादायक व्यासपीठ आणि रोगाचा अचूक उपचार करण्याची क्षमता प्रदान करते.
अंजीर वर.5a नमुना म्हणून 150 μl शुद्ध व्हायरल RNA वापरून HAV PCR चाचणीचे परिणाम दाखवते.अंजीर वर.5a(i) दर्शविते की 106 प्रती/ml च्या HAV एकाग्रतेवर, प्रतिदीप्ति तीव्रता (ΔRn) 0.830 पर्यंत पोहोचू शकते आणि जेव्हा एकाग्रता 102 प्रती/ml पर्यंत कमी केली जाते, ΔRn अजूनही 0.365 पर्यंत पोहोचू शकते, जे त्यापेक्षा जास्त आहे. रिक्त नकारात्मक नियंत्रण गटातील (0.002), सुमारे 100 पट जास्त.सहा स्वतंत्र प्रयोगांवर आधारित प्रमाणीकरणासाठी, लॉग एकाग्रता आणि IAV (Fig. 5a(ii)), R2 = 0.993, 102-106 प्रती/mL च्या चक्र थ्रेशोल्ड (Ct) दरम्यान एक रेखीय अंशांकन वक्र तयार केले गेले.पारंपारिक RT-PCR पद्धतींशी परिणाम चांगले आहेत.अंजीर वर.5a(iii) FAST-POCT प्लॅटफॉर्मच्या 40 चक्रांनंतर चाचणी परिणामांच्या फ्लोरोसंट प्रतिमा दर्शविते.आम्हाला आढळले की FAST-POCT प्लॅटफॉर्म HAV 102 प्रती/mL इतके कमी शोधू शकतो.तथापि, पारंपारिक पद्धतीमध्ये 102 प्रती/mL वर Ct मूल्य नसते, ज्यामुळे ते सुमारे 103 प्रती/mL चे LOD बनते.आम्ही असे गृहित धरले की हे बबल मिक्सिंगच्या उच्च कार्यक्षमतेमुळे असू शकते.शेक मिक्सिंग (पारंपारिक RT-PCR ऑपरेशन प्रमाणेच मिक्सिंग पद्धत), कुपी मिक्सिंग (ही पद्धत, 0.12 बारवर 3 s) आणि नियंत्रण गट म्हणून कोणतेही मिश्रण यासह विविध मिश्रण पद्धतींचे मूल्यांकन करण्यासाठी PCR चाचणी प्रयोग शुद्ध IAV RNA वर केले गेले. ..परिणाम पूरक आकृती S12 मध्ये आढळू शकतात.हे पाहिले जाऊ शकते की उच्च RNA एकाग्रतेवर (106 प्रती/mL), भिन्न मिश्रण पद्धतींची Ct मूल्ये बबल मिक्सिंगसाठी जवळजवळ समान असतात.जेव्हा RNA एकाग्रता 102 प्रती/mL पर्यंत घसरली, तेव्हा शेक मिक्स आणि कंट्रोल्समध्ये Ct मूल्य नव्हते, तर बबल मिक्स पद्धतीने अद्याप 36.9 चे Ct मूल्य दिले, जे 38 च्या Ct थ्रेशोल्डच्या खाली होते. परिणाम एक प्रभावी मिश्रण वैशिष्ट्य दर्शवतात. vesicles, जे इतर साहित्यात देखील प्रदर्शित केले गेले आहे, जे हे देखील स्पष्ट करू शकते की FAST-POCT प्लॅटफॉर्मची संवेदनशीलता पारंपारिक RT-PCR पेक्षा थोडी जास्त का आहे.अंजीर वर.5b 101 ते 106 प्रती/ml पर्यंत शुद्ध केलेल्या IBV RNA नमुन्यांच्या PCR विश्लेषणाचे परिणाम दर्शविते.R2 = 0.994 आणि 102 प्रती/mL चे LOD प्राप्त करून, परिणाम IAV चाचणीसारखेच होते.
नकारात्मक नियंत्रण (NC) म्हणून TE बफरचा वापर करून 106 ते 101 प्रती/mL पर्यंत IAV एकाग्रतेसह इन्फ्लूएंझा ए व्हायरस (IAV) चे पीसीआर विश्लेषण.(i) रिअल टाइम फ्लोरोसेन्स वक्र.(ii) FAST आणि पारंपारिक चाचणी पद्धतींसाठी लॉगरिदमिक IAV RNA एकाग्रता आणि सायकल थ्रेशोल्ड (Ct) दरम्यान रेखीय कॅलिब्रेशन वक्र.(iii) 40 चक्रांनंतर IAV FAST-POCT फ्लोरोसेंट प्रतिमा.b, (i) रिअल-टाइम फ्लूरोसेन्स स्पेक्ट्रमसह इन्फ्लूएंझा बी व्हायरस (IBV) चे पीसीआर शोध.(ii) रेखीय कॅलिब्रेशन वक्र आणि (iii) 40 चक्रांनंतर FAST-POCT IBV फ्लूरोसेन्स प्रतिमा.FAST-POCT प्लॅटफॉर्म वापरून IAV आणि IBV साठी शोधण्याची निम्न मर्यादा (LOD) 102 प्रती/mL होती, जी पारंपारिक पद्धतींपेक्षा कमी आहे (103 प्रती/mL).c IAV आणि IBV साठी मल्टीप्लेक्स चाचणी परिणाम.GAPDH चा वापर सकारात्मक नियंत्रण म्हणून केला गेला आणि संभाव्य दूषितता आणि पार्श्वभूमी प्रवर्धन टाळण्यासाठी TE बफर नकारात्मक नियंत्रण म्हणून वापरला गेला.चार वेगवेगळ्या नमुन्यांचे प्रकार ओळखले जाऊ शकतात: (1) GAPDH-केवळ नकारात्मक नमुने ("IAV-/IBV-");(2) IAV आणि GAPDH सह IAV संसर्ग (“IAV+/IBV-”);(३) IBV आणि GAPDH सह IBV संसर्ग (“IAV-/IBV+”);(4) IAV/IBV संसर्ग (“IAV+/IBV+”) IAV, IBV आणि GAPDH सह.ठिपके असलेली रेषा थ्रेशोल्ड रेषा दर्शवते.n = 6 जैविक दृष्ट्या स्वतंत्र प्रयोग केले गेले, डेटा ± मानक विचलन म्हणून दर्शविला गेला.कच्चा डेटा कच्चा डेटा फाइल्स म्हणून सादर केला जातो.
अंजीर वर.5c हे IAV/IBV साठी मल्टिप्लेक्सिंग चाचणीचे परिणाम दाखवते.येथे, शुद्ध केलेल्या RNA च्या जागी व्हायरस लाइसेटचा नमुना उपाय म्हणून वापर केला गेला आणि FAST-POCT प्लॅटफॉर्मच्या चार वेगवेगळ्या प्रतिक्रिया कक्षांमध्ये IAV, IBV, GAPDH (पॉझिटिव्ह कंट्रोल) आणि TE बफर (नकारात्मक नियंत्रण) साठी चार प्राइमर्स जोडले गेले.संभाव्य दूषितता आणि पार्श्वभूमी सुधारणे टाळण्यासाठी येथे सकारात्मक आणि नकारात्मक नियंत्रणे वापरली जातात.चाचण्या चार गटांमध्ये विभागल्या गेल्या: (1) GAPDH-नकारात्मक नमुने ("IAV-/IBV-");(2) IAV-संक्रमित (“IAV+/IBV-”) विरुद्ध IAV आणि GAPDH;(3) IBV-.संक्रमित (“IAV-”) -/IBV+”) IBV आणि GAPDH;(4) IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) IAV, IBV आणि GAPDH सह संसर्ग.अंजीर वर.5c दर्शविते की जेव्हा नकारात्मक नमुने लागू केले गेले तेव्हा, सकारात्मक नियंत्रण कक्षातील फ्लूरोसेन्स तीव्रता ΔRn 0.860 होती आणि IAV आणि IBV चे ΔRn नकारात्मक नियंत्रण (0.002) सारखेच होते.IAV+/IBV-, IAV-/IBV+ आणि IAV+/IBV+ गटांसाठी, IAV/GAPDH, IBV/GAPDH आणि IAV/IBV/GAPDH कॅमेऱ्यांनी अनुक्रमे लक्षणीय फ्लूरोसेन्स तीव्रता दर्शविली, तर इतर कॅमेऱ्यांनी पार्श्वभूमीत प्रतिदीप्तिची तीव्रता देखील दर्शविली. थर्मल सायकलिंग नंतर 40 ची पातळी.वरील चाचण्यांमधून, FAST-POCT प्लॅटफॉर्मने उत्कृष्ट विशिष्टता दर्शविली आणि आम्हाला एकाच वेळी वेगवेगळ्या इन्फ्लूएंझा व्हायरसचे पॅथोटाइप करण्याची परवानगी दिली.
FAST-POCT ची क्लिनिकल प्रयोज्यता प्रमाणित करण्यासाठी, आम्ही IB रूग्णांकडून (n=18) आणि नॉन-IB नियंत्रणे (n=18) (आकृती 6a) कडून 36 क्लिनिकल नमुने (नोज स्वॅब नमुने) तपासले.रुग्णाची माहिती पुरवणी तक्ता 3 मध्ये सादर केली आहे. IB संसर्ग स्थितीची स्वतंत्रपणे पुष्टी केली गेली आणि झेजियांग युनिव्हर्सिटी फर्स्ट एफिलिएटेड हॉस्पिटल (हँगझो, झेजियांग) द्वारे अभ्यास प्रोटोकॉल मंजूर केला गेला.रुग्णांच्या प्रत्येक नमुन्याची दोन श्रेणींमध्ये विभागणी करण्यात आली.एकावर FAST-POCT वापरून प्रक्रिया केली गेली आणि दुसरी डेस्कटॉप PCR प्रणाली (SLAN-96P, China) वापरून प्रक्रिया केली गेली.दोन्ही assays समान शुद्धीकरण आणि शोध किट वापरतात.अंजीर वर.6b FAST-POCT आणि परंपरागत रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन PCR (RT-PCR) चे परिणाम दर्शविते.आम्ही फ्लूरोसेन्स तीव्रता (FAST-POCT) ची तुलना -log2(Ct) शी केली, जिथे Ct हा पारंपारिक RT-PCR साठी सायकल थ्रेशोल्ड आहे.दोन्ही पद्धतींमध्ये चांगला करार होता.FAST-POCT आणि RT-PCR ने 0.90 (आकृती 6b) च्या पिअर्सनच्या गुणोत्तर (r) मूल्याशी मजबूत सकारात्मक संबंध दर्शविला.त्यानंतर आम्ही FAST-POCT च्या निदान अचूकतेचे मूल्यांकन केले.सकारात्मक आणि नकारात्मक नमुन्यांसाठी फ्लूरोसेन्स तीव्रता (FL) वितरण स्वतंत्र विश्लेषणात्मक उपाय म्हणून प्रदान केले गेले (Fig. 6c).आयबी रूग्णांमध्ये नियंत्रणापेक्षा FL मूल्ये लक्षणीयरीत्या जास्त होती (****P = 3.31 × 10-19; दोन-पुच्छ टी-टेस्ट) (चित्र 6d).पुढे, IBV रिसीव्हर ऑपरेटिंग वैशिष्ट्ये (ROC) वक्र प्लॉट केले गेले.आम्हाला आढळले की 1 (Fig. 6e) च्या वक्र अंतर्गत क्षेत्रासह, निदान अचूकता खूप चांगली होती.कृपया लक्षात घ्या की 2020 पर्यंत चीनमध्ये कोविड-19 मुळे अनिवार्य मास्क ऑर्डर केल्यामुळे, आम्ही IBD असलेल्या रूग्णांची ओळख पटवली नाही, म्हणून सर्व सकारात्मक क्लिनिकल नमुने (म्हणजे, अनुनासिक स्वॅब नमुने) फक्त IBV साठी होते.
क्लिनिकल अभ्यास डिझाइन.FAST-POCT प्लॅटफॉर्म आणि पारंपारिक RT-PCR वापरून 18 रुग्णांचे नमुने आणि 18 नॉन-इन्फ्लूएंझा नियंत्रणांसह एकूण 36 नमुन्यांचे विश्लेषण करण्यात आले.b FAST-POCT PCR आणि पारंपारिक RT-PCR मधील विश्लेषणात्मक सुसंगततेचे मूल्यांकन करा.परिणाम सकारात्मकपणे सहसंबंधित होते (पीअरसन आर = 0.90).c 18 IB रूग्ण आणि 18 नियंत्रणांमध्ये फ्लोरोसेन्स तीव्रता पातळी.d IB रूग्णांमध्ये (+), FL मूल्ये नियंत्रण गट (-) (****P = 3.31 × 10-19; टू-टेलेड टी-टेस्ट; n = 36) पेक्षा लक्षणीय जास्त होती.प्रत्येक चौरस प्लॉटसाठी, मध्यभागी असलेला काळा मार्कर मध्यकाचे प्रतिनिधित्व करतो आणि बॉक्सच्या खालच्या आणि वरच्या रेषा अनुक्रमे 25व्या आणि 75व्या पर्सेंटाइलचे प्रतिनिधित्व करतात.व्हिस्कर्स कमीत कमी आणि कमाल डेटा पॉइंट्सपर्यंत वाढवतात, जे आउटलियर मानले जात नाहीत.e ROC वक्र.ठिपके असलेली रेषा डी आरओसी विश्लेषणातून अंदाजित थ्रेशोल्ड मूल्य दर्शवते.IBV साठी AUC 1 आहे. कच्चा डेटा रॉ डेटा फाइल्स म्हणून प्रदान केला जातो.
या लेखात, आम्ही FAST सादर करतो, ज्यामध्ये आदर्श POCT साठी आवश्यक वैशिष्ट्ये आहेत.आमच्या तंत्रज्ञानाच्या फायद्यांमध्ये हे समाविष्ट आहे: (१) बहुमुखी डोसिंग (कॅस्केड, एकाचवेळी, अनुक्रमिक आणि निवडक), मागणीनुसार रिलीझ (लागू दाब जलद आणि प्रमाणात सोडणे) आणि विश्वसनीय ऑपरेशन (150 अंशांवर कंपन) (2) दीर्घकालीन स्टोरेज (2 वर्षे प्रवेगक चाचणी, वजन कमी होणे सुमारे 0.3%);(3) ओलेपणा आणि चिकटपणाच्या विस्तृत श्रेणीसह द्रवांसह कार्य करण्याची क्षमता (5500 cP पर्यंत चिकटपणा);(४) किफायतशीर (फास्ट-पीओसीटी पीसीआर उपकरणाची अंदाजे सामग्री किंमत अंदाजे US$1 आहे).मल्टीफंक्शनल डिस्पेंसर एकत्र करून, इन्फ्लूएन्झा A आणि B व्हायरसच्या पीसीआर शोधण्यासाठी एकात्मिक FAST-POCT प्लॅटफॉर्मचे प्रात्यक्षिक आणि लागू केले गेले.FAST-POCT ला फक्त 82 मिनिटे लागतात.36 अनुनासिक स्वॅब नमुन्यांसह क्लिनिकल चाचण्यांमध्ये मानक RT-PCR (पीअरसन गुणांक > 0.9) सह फ्लूरोसेन्स तीव्रतेमध्ये चांगले सामंजस्य दिसून आले.36 अनुनासिक स्वॅब नमुन्यांसह क्लिनिकल चाचण्यांमध्ये मानक RT-PCR (पीअरसन गुणांक > 0.9) सह फ्लूरोसेन्स तीव्रतेमध्ये चांगले सामंजस्य दिसून आले.Клинические тесты с 36 образцами мазков из носа показали хорошее соответствие интенсивности Плуоресценции Плуоресценции флуоресценции стан irsona > 0,9).अनुनासिक स्वॅबच्या 36 नमुन्यांसह नैदानिक ​​चाचण्यांनी मानक RT-PCR (Pearson's coefficients > 0.9) च्या फ्लूरोसेन्स तीव्रतेशी चांगला करार दर्शविला. RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков из носа показали хорошее совпадение интенсивности флуоресценции со станОресценции irsona > 0,9).36 अनुनासिक स्वॅब नमुन्यांच्या क्लिनिकल चाचणीमध्ये मानक RT-PCR (पीअरसन गुणांक > 0.9) सह फ्लोरोसेन्स तीव्रतेचा चांगला करार दिसून आला.या कामाच्या समांतर, विविध उदयोन्मुख जैवरासायनिक पद्धतींनी (उदा., प्लाझ्मा थर्मल सायकलिंग, एम्प्लीफिकेशन-फ्री इम्युनोअसे आणि नॅनोबॉडी फंक्शनलायझेशन असेस) POCT मध्ये त्यांची क्षमता दर्शविली आहे.तथापि, पूर्णत: एकात्मिक आणि मजबूत POCT प्लॅटफॉर्मच्या अभावामुळे, या पद्धतींना अपरिहार्यपणे वेगळ्या पूर्व-प्रक्रिया प्रक्रियेची आवश्यकता आहे (उदा., RNA अलगाव44, उष्मायन45 आणि वॉशिंग46), जे या पद्धतींसह प्रगत POCT कार्ये अंमलात आणण्यासाठी सध्याच्या कामास पूरक आहेत. आवश्यक पॅरामीटर्स.प्राप्त-इन-प्रतिसाद-आउटपुट कार्यप्रदर्शन.या कामात, फास्ट व्हॉल्व्ह सक्रिय करण्यासाठी वापरला जाणारा हवा पंप बेंचटॉप इन्स्ट्रुमेंट (चित्र S9, S10) मध्ये समाकलित होण्याइतपत लहान असला तरीही, तो अजूनही लक्षणीय उर्जा वापरतो आणि आवाज निर्माण करतो.तत्वतः, लहान फॉर्म फॅक्टर वायवीय पंप इतर माध्यमांद्वारे बदलले जाऊ शकतात, जसे की इलेक्ट्रोमॅग्नेटिक फोर्स किंवा फिंगर ऍक्युएशन.पुढील सुधारणांमध्ये, उदाहरणार्थ, वेगवेगळ्या आणि विशिष्ट बायोकेमिकल ॲसेससाठी किटचे रुपांतर करणे, नवीन शोध पद्धती वापरणे ज्यांना हीटिंग/कूलिंग सिस्टमची आवश्यकता नाही, अशा प्रकारे पीसीआर ऍप्लिकेशन्ससाठी टूल-फ्री POCT प्लॅटफॉर्म प्रदान करणे समाविष्ट असू शकते.आमचा विश्वास आहे की FAST प्लॅटफॉर्म द्रवपदार्थ हाताळण्याचा एक मार्ग प्रदान करतो, आमचा विश्वास आहे की प्रस्तावित FAST तंत्रज्ञान केवळ जैववैद्यकीय चाचणीसाठीच नाही तर पर्यावरण निरीक्षण, अन्न गुणवत्ता चाचणी, सामग्री आणि औषध संश्लेषणासाठी एक समान व्यासपीठ तयार करण्याची क्षमता सादर करते. ..
झेजियांग युनिव्हर्सिटी फर्स्ट एफिलिएटेड हॉस्पिटल (IIT20220330B) च्या नीतिशास्त्र समितीने मानवी अनुनासिक स्वॅबचे नमुने गोळा करणे आणि वापरण्यास मान्यता दिली आहे.36 अनुनासिक स्वॅब नमुने गोळा करण्यात आले, ज्यामध्ये 30 वर्षांपेक्षा कमी वयाचे 16 प्रौढ, 7 प्रौढ > 40 वर्षे वयोगटातील 19 पुरुष, 17 महिलांचा समावेश आहे.36 अनुनासिक स्वॅब नमुने गोळा करण्यात आले, ज्यामध्ये 30 वर्षांपेक्षा कमी वयाचे 16 प्रौढ, 7 प्रौढ > 40 वर्षे वयोगटातील 19 पुरुष, 17 महिलांचा समावेश आहे.Было собрано 36 образцов мазков из носа, в которых приняли участие 16 взрослых < 30 лет, 7 взрослых старше, ж19ж7ут 40.30 वर्षांपेक्षा कमी वयाच्या 16 प्रौढ, 40 वर्षांवरील 7 प्रौढ, 19 पुरुष आणि 17 महिलांकडून छत्तीस अनुनासिक स्वॅबचे नमुने गोळा करण्यात आले..लोकसंख्याशास्त्रीय डेटा पुरवणी तक्ता 3 मध्ये सादर केला आहे. सर्व सहभागींकडून माहितीपूर्ण संमती प्राप्त झाली आहे.सर्व सहभागींना इन्फ्लूएन्झा झाल्याचा संशय होता आणि भरपाई न देता स्वेच्छेने चाचणी केली गेली.
FAST बेस आणि झाकण पॉलिलेक्टिक ऍसिड (PLA) चे बनलेले आहे आणि Ender 3 Pro 3D प्रिंटर (Shenzhen Transcend 3D Technology Co., Ltd.) द्वारे मुद्रित केले आहे.दुहेरी बाजू असलेला टेप Adhesives Research, Inc. मॉडेल 90880 कडून खरेदी करण्यात आला. McMaster-Carr कडून 100 µm जाडीची PET फिल्म खरेदी करण्यात आली.सिल्हूट अमेरिका, इंक मधील सिल्हूट कॅमिओ 2 कटर वापरून चिकट आणि पीईटी फिल्म दोन्ही कापली गेली. लवचिक फिल्म इंजेक्शन मोल्डिंगद्वारे पीडीएमएस सामग्रीपासून बनविली जाते.प्रथम, लेसर प्रणाली वापरून 200 µm जाडीची PET फ्रेम कापली गेली आणि 100 µm दुहेरी बाजू असलेला चिकट टेप वापरून 3 मिमी जाडीच्या PMMA शीटला चिकटवली गेली.PDMS पूर्ववर्ती (Sylgard 184; भाग A: Part B = 10:1, Dow Corning) नंतर मोल्डमध्ये ओतले गेले आणि अतिरिक्त PDMS काढण्यासाठी काचेच्या रॉडचा वापर केला गेला.3 तासांसाठी 70° C. वर बरे केल्यानंतर, 300 μm जाडीची PDMS फिल्म साच्यातून सोलली जाऊ शकते.
अष्टपैलू वितरण, मागणीनुसार प्रकाशन आणि विश्वासार्ह कामगिरीसाठी फोटो हाय-स्पीड कॅमेरा (Sony AX700 1000 fps) ने घेतले जातात.विश्वासार्हता चाचणीमध्ये वापरलेला ऑर्बिटल शेकर SCILOGEX (SCI-O180) कडून खरेदी केला होता.हवेचा दाब एअर कंप्रेसरद्वारे तयार केला जातो आणि दाब मूल्य समायोजित करण्यासाठी अनेक डिजिटल अचूक दाब नियामक वापरले जातात.प्रवाह वर्तन चाचणी प्रक्रिया खालीलप्रमाणे आहे.चाचणी यंत्रामध्ये द्रवपदार्थाची पूर्वनिर्धारित रक्कम इंजेक्ट केली गेली आणि प्रवाह वर्तन रेकॉर्ड करण्यासाठी हाय स्पीड कॅमेरा वापरला गेला.स्थिर प्रतिमा नंतर ठराविक वेळी प्रवाह वर्तनाच्या व्हिडिओंमधून घेतल्या गेल्या आणि उर्वरित क्षेत्र इमेज-प्रो प्लस सॉफ्टवेअर वापरून मोजले गेले, जे नंतर व्हॉल्यूमची गणना करण्यासाठी कॅमेरा खोलीने गुणाकार केले गेले.प्रवाह वर्तन चाचणी प्रणालीचे तपशील पूरक आकृती S4 मध्ये आढळू शकतात.
50 µl मायक्रोबीड्स आणि 100 µl डिआयोनाइज्ड पाणी कुपी मिक्सिंग यंत्रामध्ये इंजेक्ट करा.0.1 बार, 0.15 बार आणि 0.2 बारच्या दाबाने प्रत्येक 0.1 सेकंदाला हाय स्पीड कॅमेऱ्याने मिश्र कामगिरीची छायाचित्रे घेतली गेली.मिश्रण प्रक्रियेदरम्यान पिक्सेल माहिती फोटो प्रोसेसिंग सॉफ्टवेअर (फोटोशॉप CS6) वापरून या प्रतिमांमधून मिळवता येते.आणि मिश्रणाची कार्यक्षमता खालील समीकरण 53 द्वारे प्राप्त केली जाऊ शकते.
जेथे M ही मिक्सिंग कार्यक्षमता आहे, N ही नमुना पिक्सेलची एकूण संख्या आहे आणि ci आणि \(\bar{c}\) सामान्यीकृत आणि अपेक्षित सामान्यीकृत सांद्रता आहेत.मिक्सिंग कार्यक्षमता 0 (0%, अमिश्रित) ते 1 (100%, पूर्णपणे मिश्रित) पर्यंत असते.परिणाम पूरक आकृती S6 मध्ये दर्शविले आहेत.
IAV आणि IBV साठी रिअल-टाइम RT-PCR किट, IAV आणि IBV RNA नमुन्यांसह (मांजर क्रमांक RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, China), Tris-EDTA बफर (TE बफर क्रमांक B541019) , सांगोन बायोटेक, चायना), पॉझिटिव्ह कंट्रोल आरएनए प्युरिफिकेशन किट (भाग क्र. Z-ME-0010, लाईफरिव्हर, चायना) आणि GAPDH सोल्युशन (भाग क्र. M591101, सांगोन बायोटेक, चीन) व्यावसायिकरित्या उपलब्ध आहेत.RNA शुद्धिकरण किटमध्ये बाइंडिंग बफर, वॉश ए, वॉश डब्ल्यू, एल्युएंट, मॅग्नेटिक मायक्रोबीड्स आणि ॲक्रेलिक कॅरियर समाविष्ट आहे.IAV आणि IBV रिअल-टाइम RT-PCR किटमध्ये IFVA न्यूक्लिक ॲसिड पीसीआर डिटेक्शन मिक्स आणि RT-PCR एन्झाइमचा समावेश होतो.500 μl बाइंडिंग बफर सोल्युशनमध्ये 6 µl AcrylCarrier आणि 20 µl चुंबकीय मणी घाला, चांगले हलवा आणि नंतर मणीचे द्रावण तयार करा.A आणि W वॉशमध्ये 21 मिली इथेनॉल घाला, अनुक्रमे A आणि W चे द्रावण मिळविण्यासाठी चांगले हलवा.त्यानंतर, IFVA न्यूक्लिक ॲसिडसह 18 µl फ्लोरोसेंट PCR मिश्रण आणि 1 µl RT-PCR एन्झाइम 1 µl TE सोल्युशनमध्ये जोडले गेले, हलवले गेले आणि कित्येक सेकंदांसाठी सेंट्रीफ्यूज केले गेले, 20 µl IAV आणि IBV प्राइमर मिळवले.
खालील आरएनए शुद्धीकरण प्रक्रियेचे अनुसरण करा: (1) आरएनए शोषण.1.5 मिली सेंट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये 526 μl गोळ्याचे द्रावण पिपेट करा आणि 150 μl नमुना घाला, नंतर नळी हाताने वर आणि खाली 10 वेळा हलवा.मिश्रणाचा 676 μl ऍफिनिटी कॉलममध्ये स्थानांतरित करा आणि 60 सेकंदांसाठी 1.88 x 104 g वर सेंट्रीफ्यूज करा.त्यानंतरचे नाले टाकून दिले जातात.(२) धुण्याचा पहिला टप्पा.ॲफिनिटी कॉलममध्ये 500 μl वॉश सोल्यूशन A जोडा, 40 s साठी 1.88 x 104 g वर सेंट्रीफ्यूज करा आणि खर्च केलेले द्रावण टाकून द्या.ही वॉशिंग प्रक्रिया दोनदा पुनरावृत्ती होते.(३) धुण्याचा दुसरा टप्पा.ॲफिनिटी कॉलममध्ये 500 μl वॉश सोल्यूशन W जोडा, 15 s साठी 1.88×104 g वर सेंट्रीफ्यूज करा आणि खर्च केलेले द्रावण टाकून द्या.ही वॉशिंग प्रक्रिया दोनदा पुनरावृत्ती होते.(4) उत्सर्जन.ॲफिनिटी कॉलममध्ये 200 μl एल्युएट जोडा आणि 2 मिनिटांसाठी 1.88 x 104 ग्रॅम वर सेंट्रीफ्यूज करा.(5) RT-PCR: PCR ट्यूबमध्ये प्राइमर सोल्यूशनच्या 20 μl मध्ये इल्युएट इंजेक्ट केले गेले, त्यानंतर RT-PCR प्रक्रिया पार पाडण्यासाठी ट्यूब रिअल-टाइम पीसीआर चाचणी उपकरण (SLAN-96P) मध्ये ठेवली गेली.संपूर्ण तपास प्रक्रियेस अंदाजे 140 मिनिटे लागतात (आरएनए शुद्धीकरणासाठी 20 मिनिटे आणि पीसीआर शोधण्यासाठी 120 मिनिटे).
526 µl मणीचे द्रावण, 1000 µl वॉश सोल्यूशन A, 1000 µl वॉश सोल्यूशन W, 200 µl इल्युएट आणि 20 µl प्राइमर सोल्यूशन प्राथमिकपणे जोडले गेले आणि चेंबर M, W1, W2, E आणि PCR डिटेक्शन चेंबरमध्ये साठवले गेले.प्लॅटफॉर्म असेंब्ली.त्यानंतर, 150 μl नमुना चेंबर M मध्ये पिपेट केला गेला आणि FAST-POCT प्लॅटफॉर्म पुरवणी आकृती S9 मध्ये दर्शविलेल्या चाचणी साधनामध्ये घातला गेला.सुमारे 82 मिनिटांनंतर, चाचणी परिणाम उपलब्ध झाले.
अन्यथा लक्षात घेतल्याशिवाय, फक्त FAST-POCT प्लॅटफॉर्म आणि जैविक दृष्ट्या स्वतंत्र नमुने वापरून किमान सहा प्रतिकृतींनंतर सर्व चाचणी परिणाम सरासरी ± SD म्हणून सादर केले जातात.विश्लेषणातून कोणताही डेटा वगळण्यात आला नाही.प्रयोग यादृच्छिक नाहीत.प्रयोगादरम्यान संशोधक गट कार्यांमध्ये आंधळे नव्हते.
अभ्यासाच्या रचनेबद्दल अधिक माहितीसाठी, या लेखाशी जोडलेला निसर्ग संशोधन अहवाल गोषवारा पहा.
या अभ्यासाच्या परिणामांना आधार देणारा डेटा पूरक माहितीमध्ये उपलब्ध आहे.हा लेख मूळ डेटा प्रदान करतो.
छागला, झेड. आणि मधुकर, पी. श्रीमंत राष्ट्रांमधील कोविड-19 बूस्टर सर्वांसाठी लसींना उशीर करतील.छागला, झेड. आणि मधुकर, पी. श्रीमंत राष्ट्रांमधील कोविड-19 बूस्टर सर्वांसाठी लसींना उशीर करतील.छागला, झेड. आणि मधुकर, पी. श्रीमंत देशांमध्ये कोविड-19 बूस्टर प्रत्येकासाठी लसींना उशीर करतील.छागला, झेड. आणि मधुकर, पी. श्रीमंत देशांमध्ये कोविड-19 लसीकरण प्रत्येकासाठी लसीकरणास विलंब करेल.राष्ट्रीय औषध.27, 1659-1665 (2021).
फॉस्ट, एल. आणि इतर.कमी आणि मध्यम उत्पन्न असलेल्या देशांमध्ये SARS-CoV-2 चाचणी: खाजगी आरोग्य सेवा क्षेत्रातील उपलब्धता आणि परवडणारीता.सूक्ष्मजीव संसर्ग.22, 511–514 (2020).
जागतिक आरोग्य संघटना.निवडक बरा करण्यायोग्य लैंगिक संक्रमित संक्रमणांचे जागतिक प्रसार आणि घटना: एक पुनरावलोकन आणि अंदाज.जिनिव्हा: WHO, WHO/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001).
फेंटन, ईएम इ.एकाधिक 2D मोल्डेड साइड फ्लो चाचणी पट्ट्या.ASS अर्ज.गुरुकुल.इंटर मिलान.1, 124-129 (2009).
शिलिंग, KM et al.पूर्णपणे संलग्न मायक्रोफ्लुइडिक पेपर-आधारित विश्लेषण उपकरण.गुद्द्वाररासायनिक.८४, १५७९–१५८५ (२०१२).
Lapenter, N. et al.एंजाइम-सुधारित इलेक्ट्रोडसह स्पर्धात्मक पेपर-आधारित इम्युनोक्रोमॅटोग्राफी वायरलेस मॉनिटरिंग आणि मूत्रमार्गातील कोटिनिनचे इलेक्ट्रोकेमिकल निर्धारण करण्यास अनुमती देते.सेन्सर्स 21, 1659 (2021).
झू, एक्स आणि इतर.ग्लुकोमीटर वापरून बहुमुखी नॅनोझाइम-इंटिग्रेटेड लॅटरल फ्लुइड प्लॅटफॉर्मसह रोग बायोमार्कर्सचे प्रमाण निश्चित करणे.जैविक सेन्सर.बायोइलेक्ट्रॉनिक्स.१२६, ६९०–६९६ (२०१९).
बू, एस. वगैरे.गर्भधारणा चाचणी पट्टी कॉनकानाव्हलिन ए-ह्युमन कोरिओनिक गोनाडोट्रॉपिन-सीयू3(पीओ4)2 हायब्रिड नॅनोफ्लॉवर, चुंबकीय पृथक्करण आणि स्मार्ट फोन वाचन वापरून रोगजनक जीवाणू शोधण्यासाठी.सूक्ष्म संगणक.मासिक.185, 464 (2018).